Quy trình kiểm tra E. coli (Escherichia coli) thường được thực hiện trong các phòng thí nghiệm vi sinh để phát hiện sự hiện diện của vi khuẩn này trong mẫu thực phẩm, nước hoặc mẫu sinh phẩm. Dưới đây là một quy trình kiểm tra E. coli điển hình:
1. Chuẩn bị mẫu
- Thu thập mẫu: Lấy mẫu thực phẩm, nước hoặc mẫu sinh phẩm cần kiểm tra.
- Pha loãng mẫu: Nếu cần, pha loãng mẫu trong dung dịch đệm vô trùng (ví dụ: nước muối sinh lý 0.85%) để giảm nồng độ vi khuẩn.
2. Cấy mẫu vào môi trường chọn lọc
- Sử dụng môi trường chọn lọc để ức chế vi khuẩn khác và khuyến khích sự phát triển của E. coli. Một số môi trường phổ biến bao gồm:
- MacConkey Agar: E. coli thường tạo ra khuẩn lạc màu hồng do lên men lactose.
- EMB Agar (Eosin Methylene Blue): E. coli tạo ra khuẩn lạc có ánh kim loại màu xanh lá cây.
- Chromogenic Agar: Môi trường đặc biệt giúp E. coli tạo ra khuẩn lạc màu sắc đặc trưng.
3. Ủ mẫu
- Đặt đĩa petri vào tủ ấm ở nhiệt độ 35-37°C trong 18-24 giờ.
- Sau thời gian ủ, quan sát sự phát triển của khuẩn lạc.
4. Quan sát và phân tích khuẩn lạc
- Kiểm tra đĩa petri để xác định khuẩn lạc nghi ngờ là E. coli dựa trên:
- Hình dạng khuẩn lạc.
- Màu sắc khuẩn lạc (ví dụ: màu hồng trên MacConkey Agar).
- Sự hiện diện của ánh kim loại trên EMB Agar.
5. Xác nhận bằng các thử nghiệm sinh hóa
- Thực hiện các thử nghiệm sinh hóa để xác nhận E. coli:
- Thử nghiệm Indole: E. coli thường dương tính (tạo màu đỏ với thuốc thử Kovac’s).
- Thử nghiệm Methyl Red (MR): E. coli thường dương tính.
- Thử nghiệm Voges-Proskauer (VP): E. coli thường âm tính.
- Thử nghiệm Citrate: E. coli thường âm tính.
6. Phân tích PCR hoặc phương pháp phân tử (nếu cần)
- Sử dụng kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) để phát hiện gen đặc trưng của E. coli (ví dụ: gen uidA).
- Phương pháp này cho kết quả nhanh và chính xác cao.
7. Báo cáo kết quả
- Ghi nhận kết quả và so sánh với tiêu chuẩn cho phép (ví dụ: tiêu chuẩn về E. coli trong thực phẩm hoặc nước).
- Nếu E. coli vượt quá giới hạn cho phép, cần thực hiện các biện pháp xử lý phù hợp.
- NAME PRODUCT
- SPECIFICATION